蛋白生物标志物已成为神经科学研究的核心，尤其在神经退行性疾病和神经炎症病症的治疗靶点开发方面。酶联免疫吸附试验 (ELISA) 作为蛋白生物标志物的主要检测技术，虽具备良好的特异性和稳健性，但传统ELISA技术在实际应用中仍存在操作繁琐、耗时长、重复性有限、样本需求量大以及仅能单因子检测等局限。鉴于此，ProteinSimple开发了全自动免疫分析平台 Ella™，集全自动化、快速、高灵敏、多因子分析能力于一体，让生物标志物检测更快！更准！更省心！
主要优势：
(1) 全自动 ELISA 检测平台，简单方便
(2) 无与伦比的精准度，不同批次、不同用户、不同仪器以及不同地点之间的差异极小
(3) 无需做标曲、4-log宽动态范围、灵敏度可达亚pg
(4) 工作流程简化，仅需 90 分钟即可得出结果
(5) 平台功能多样，支持早研发现到临床转化生物标志物研究，且能无缝进行方法学转移
举例：明星指标p-Tau 217
采用 Ella全自动免疫分析平台定量检测血浆和CSF中pTau-217的含量。结果表明，这种新型免疫检测法可作为一种灵敏、精确、快速且易于使用的研究方法，用于检测生物流体中的 pTau-217 蛋白。
01. 动态范围和定量限
图1. pTau-217卡盒标准曲线和动态范围
在多个检测卡盒及不同批次卡盒上运行曲线时，定量限(LOQ) 内的所有点回收率均在80%-120% 之间，且变异系数 (CV) 低于 20%。
图2. pTau-217卡盒LLOQ定量的精确度
通过对含有 pTau - 217的血浆样本进行系列稀释，样本中抗原水平分别高于和低于定量下限 (LLOQ) 阈值，从而对定量下限进行进一步确认。结果显示，在定量限范围内的所有样本，回收率均在 80% 至 120% 之间，变异系数 (CV) ≤20% 。
02. 检测性能
(1) 精确度
图3. pTau-217卡盒检测精确度
左图：将低浓度和高浓度的对照样本在三个不同批次的Ella卡盒中重复检测 (n=6) 。结果显示，批间变异系数CV均 ≤5%，该检测平台的批内精确度高。右图：由多名操作人员使用2个批次多个检测卡盒以及多台Ella分析仪，对高浓度 (红色) 和低浓度 (蓝色) 的对照样本进行制备和检测。结果显示，批间精确度高 (变异系数 CV≤12%) 。
(2) 批次间一致性
图4. pTau-217卡盒检测批次间可重复性
通过在两个独立批次的卡盒上运行检测浓度值在检测范围内的不同样本，来评估卡盒批次间的重现性。结果表明，通过Bland-Altman分析 (左图) 和线性回归分析 (右图) ，不同批次卡盒的检测浓度值具有可接受的等效性。
(3) 线性稀释和掺入回收
图5. 血浆和CSF样本线性稀释回收
所有血浆和脑脊液样本均表现出良好的线性回收，平均回收率均在80%到120%之间 (血浆的平均回收率为100%，脑脊液的平均回收率为94%) 。
图6. 血浆和CSF样本掺入回收
准确性通过在血浆和脑脊液中进行掺入回收实验评估，使用三种不同浓度 (高/中/低浓度) 的掺入分析物来评估。结果发现，添加了 EDTA 的血浆样本回收率为89%，而脑脊液样本的平均回收率为127%。
03. 临床样本检测
图7. pTau-217在健康供体和AD患者血浆和脑脊液中的检测
血浆 (左侧) 和脑脊液 (右侧) 中的pTau-217水平在健康供体与临床诊断的阿尔茨海默病患者之间进行了比较。与健康对照组及ATN阴性患者相比，ATN阳性患者 (ATN+) 在血浆和脑脊液中的pTau-217显著升高。在比较ATN+和淀粉样蛋白阳性 (A+) 患者组时，也发现了脑脊液pTau水平的显著差异。统计分析使用了Kruskal-Wallis检验，随后进行了Dunn’s多重比较事后检验。
04. 多平台检测一致性
图8. Ella平台与Simoa平台平行评估血浆中pTau-217含量
图9. 二种检测平台的相关性
上图：使用 Simple Plex pTau - 217 ALZpath 检测法与基于微珠的平台 (Simoa pTau - 217 ALZpath 检测法) 并行测量血浆 pTau - 217 含量比较。两种平台均显示，在阿尔茨海默病 (AD) 患者样本 (ATN 表型) 中，pTau - 217 水平显著升高 (p < 0.001)。下图：两种平台的相关性分析。
综上结果表明，这种新型免疫检测法Ella可作为一种灵敏、精确、快速且易于使用的研究方法，用于测量生物样本中的pTau - 217蛋白含量。
Ella神经退行性疾病的分析指标清单
更多指标可访问：Neuroscience Assays for Ella | Bio-Techne
* 本文转载自「ProteinSimple」微信公众号
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ProteinSimple 是美国纳斯达克上市公司Bio-Techne集团 (NASDAQ:TECH) 旗下的蛋白质分析品牌。“使蛋白质分析更简单”是ProteinSimple 一直以来的愿景。ProteinSimple长期致力于研发和生产更精准、更快速、更灵敏的创新性蛋白质分析工具，包括蛋白质电荷表征、蛋白质纯度分析、蛋白质翻译后修饰定量检测、蛋白质免疫检测技术如数字Western Blot和高灵敏微流控多重ELISA，以帮助生物制药、细胞与基因治疗、生物医学和生命科学等领域科学家解决蛋白质分析问题，加速药物研发效率，深度解析蛋白质和疾病的关系。作为ProteinSimple华东大区 (江、浙、沪、皖、山东) 的授权代理商，上海昊扩将为大家提供ProteinSimple旗下仪器设备。点击下方链接查看更多产品详情：
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上海昊扩科学器材有限公司成立于2019年，总部位于上海，是一家实验室设备/耗材及分析仪器的专业服务商。公司致力于为生物、医药、物性检测、化工分析、食品、工业生产等相关领域客户提供国内外高科技专业设备以及技术咨询服务。
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