重组腺相关病毒 (AAV) 是目前体内基因治疗最常用的递送平台。AAV 的衣壳由三种重叠的病毒蛋白（VP1、VP2、VP3）组装而成，其典型的化学计量比约为 1:1:10。这三种蛋白的比例分布直接决定了衣壳的转运能力和最终的转基因表达效率。因此，对 VP 比例进行高精度的定量分析，是 AAV 效价监控和产品放行的核心质控环节。
最近，中国食品药品检定研究院（NIFDC）的研究团队在国际知名期刊 Electrophoresis 上发表了最新研究成果。该研究巧妙地结合了样品前处理与物理学堆积效应，在 ProteinSimple Maurice CE-SDS 平台上开发出了一种高灵敏、无标记的紫外吸收（UV）检测方法 ，用详实的数据证明了 Maurice 系统在 AAV 质控中的卓越性能。
01. 行业痛点：AAV 质控分析中的“鱼与熊掌”
在测定 AAV VP 比例时，分析人员常面临两难选择：
激光诱导荧光（LIF）检测：虽然灵敏度极高，但在分离前必须对蛋白进行共价染料标记。这种额外操作不仅可能引入杂质，且不同染料对特定蛋白组分可能存在标记偏差，导致比例失真。
紫外（UV）吸收检测：无需标记，能提供最真实、无偏差的定量数据。但 UV 的固有灵敏度往往不足以准确定量丰度极低的 VP1 和 VP2。
如何兼得“无标记的真实性”与“超高的灵敏度”？本研究团队在 Maurice 平台上给出了一套极具巧思的解决方案。
02. 突破性策略：甲醇沉淀 + 进样堆积，潜力全面释放
研究团队将 Maurice 平台高度自动化的电动进样（Electrokinetic injection）功能与经典的“样品堆积（Sample Stacking）”物理效应完美结合，实现了强悍的性能表现：
(1) 灵敏度跃升：信号放大 6 倍，攻克低丰度检测壁垒
通过应用上述“进样堆积”策略，UV 检测的灵敏度得到了质的飞跃。
数据亮点：在相同的 2.0 × 10¹² GC/mL 浓度下，采用堆积进样法后，蛋白峰面积实现了惊人的 6 倍增长！
极限突破：在该方法下，主峰 VP3 的定量限（LOQ）成功下探至极低的 1.2 × 10¹¹ GC/mL。
图 1：Maurice 系统灵敏度跃升。采用进样堆积技术（A）较常规进样（B），VP3 峰面积实现 6 倍信号放大，轻松攻克低丰度定量壁垒。
(2) 完美的线性范围与跨浓度的绝对一致性
一个可靠的质控方法，其测定的比例绝不能因样品浓度的波动而改变。
宽线性范围：研究表明，总 VP 浓度在 2.0 × 10¹² 至 3.0 × 10¹³ GC/mL 范围内呈现出极佳的线性关系（R² = 0.988）。
绝对一致的比例：在确定的最佳上样浓度范围内（6.15 × 10¹² 至 1.85 × 10¹³ GC/mL），Maurice 能够极其稳定地输出 VP1/VP2/VP3 的比例。即使是微量的 VP2 和 VP1，其测定百分比的相对标准偏差（RSD%）也全部保持在 7% 以下。
图 2：跨浓度的绝对一致性。在6.15 × 10¹² 至 1.85 × 10¹³ GC/mL浓度范围内，Maurice 系统完美再现高度一致的 VP 色谱峰型。
(3) 极致的仪器稳定性：多日精密度验证
为了验证方法的耐用性，研究人员在 1.23 × 10¹³ GC/mL 的典型上样浓度下，进行了连续 3 天的精密度测试。
数据亮点：连续 3 天的日间重复性极佳，VP3、VP2、VP1 比例的 RSD% 分别低至惊人的 0.2%、4.2% 和 1.4%。这充分证明了 Maurice 系统在全自动运行下的极致稳定性和抗干扰能力。
图 3：极致的多日精密度与重现性。在 1.23 × 10¹³ GC/mL 典型浓度下，Maurice 系统连续 3 天运行的 AAV9 样品代表性电泳图（B-D）及空白对照（A）。谱图高度一致，完美展现了全自动运行下优异的抗干扰能力。
(4) 平台通用性：不仅是 AAV9，更是全能选手
除了在 AAV9 上表现优异外，研究团队还将该分析流程平移到了其他血清型中 。
数据亮点：成功测定了 AAV2（VP3:VP2:VP1 = 12.4:1.0:1.3）和 AAV8（7.1:1.4:1.0）样品的蛋白比例。更值得一提的是，Maurice 的高分辨率甚至清晰地分离出了 AAV2 和 AAV8 样品中特有的“前置 VP3 截短峰（VP3 clip）”。
图 4：多血清型广谱兼容。Maurice 系统不仅精准备测定 AAV9，更清晰分离了 AAV2（A）和 AAV8（B）中的特有前置 VP3 截短峰（VP3' clip），分辨率极佳。
04. 为何选择Maurice CE-SDS 进行 AAV 质控？
NIFDC 的这项前沿研究证明 ProteinSimple Maurice CE-SDS 系统以其不可替代的核心价值，正成为基因治疗领域的得力助手：
(1) 回归真实，告别标记偏差：
依托仪器优异的 220 nm UV 检测基线与灵活的进样控制，无需繁琐的荧光标记，即可实现低丰度蛋白的真实绝对定量。
(2) 全自动化的“一键式”操作：
一切步骤（毛细管预处理、填胶、电动进样、分离检测）均由 Compass 软件全自动预设执行。人为操作误差降至最低。
(3) 多血清型广谱兼容：
无论是 AAV2、AAV8 还是 AAV9，Maurice 都能提供一站式的清晰分离方案。
* 全文实验数据与技术细节参考原文：
Li Y, Sun Y, Li X, et al. Determination of AAV Capsid Protein Ratios by Sodium Dodecyl Sulfate Capillary Electrophoresis (CE‐SDS)—UV Absorption Method[J]. Electrophoresis, 2026.
* 本文转载自「ProteinSimple」微信公众号
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