诺坦普 (NanoTemper) 

新一代 Monolith 系列分子互作分析仪

MO 系列分子互作仪，采用创新性的光谱位移技术 (Spectral Shift) 和 经典的微量热泳动技术 (MicroScale Thermophoresis, MST)，轻松检测具有挑战性的分子互作。仅需极微量的样品 , 即可在液体环境中快速、精确地定量检测各种类型的分子间相互作用力，且检测浓度范围广、操作简单。

1. 技术优势

功能全面，灵活应对不同类型的亲和力检测项目

（1）实现几乎所有类型分子间的亲和力检测：从IDPs、膜蛋白、大型蛋白复合体到PROTACs、小分子甚至离子，检测各种类型的分子间结合。

（2）不依赖于分子量和粒径变化检测：结合检测不受由配体结合引起的粒径和分子量变化限制。

（3）样品消耗量极低：为 ITC 实验准备大量的、高浓度的互作样品是非常困难的。Monolith 系列仅需几微升的样品浓度即可，为您节约宝贵的样品。

（4）液体环境检测，更接近天然条件：在液体环境中直接检测，且适用于几乎所有的缓冲液，保证样品在天然条件下自由发生相互作用，获得更可靠的结果。

（5）不仅限于取得K_d值数据：研究人员还可计算结合的化学计量比*和热力学参数*，并通过竞争结合实验进行相对亲和力 和协同性评估*。 

* 需进行线下数据处理及分析，无法在MO系列仪器配套软件中完成。

（6）不局限于两种分子间的互作分析：竞争结合实验、多种分子结合检测都可以轻松搞定。

高品质的毛细管则保证了高品质的数据，使用毛细管的优势众多：仅需微量样品，在溶液中检测， 接近天然环境，无需固定样品，甚至无需进行蛋白纯化。

2. 技术原理

Monolith 可搭载光谱位移和 MST 两种生物物理检测方法，用于结合亲和力的检测。 在实验中，我们对其中一个分子进行荧光标记*，然后将其与一系列梯度稀释的结合分子等量混匀，接下来使用毛细管吸取样品并放入仪器开始检测。 

*此外，色氨酸内源荧光也可用于免标记 MST 检测。

（1）光谱位移技术（Spectral Shift ）

光谱位移技术通过荧光发射光谱的蓝移或红移来检测分子间的结合。Monolith X 在等温条件下精确检测 650nm 和 670nm 双波长的发射光，因而能够精确检测到极细微的光谱位移。接下来，以配体浓度为横坐标，双波长荧光强度的比值为纵坐标作图，拟合得到平衡解离常数 K_d。

（2）微量热泳动技术（MicroScale Thermophoresis）

微量热泳动（MicroScale Thermophoresis，MST） 是一种定量分析生物分子间相互作用的前沿技术。通过精确检测荧光变化，结合灵敏的热泳动现象，MST 提供了一种灵活、强大和快速测量分子间相互作用的 方法。MST 技术是通过激光在溶液中产生精确而短暂的温度变化从而检测配体结合引起的荧光强度变化。以配体浓度为横坐标，荧光值为纵坐标作图，从而获得平衡解离常数 K_d。

MO 系列仪器测量一个 K_d 值仅需 10 分钟，专家模式下最快仅需 90 秒，而无需额外冗长的数据分析。通过检测与配体结合后，荧光标记的蛋白或者具有自发荧光的样品的荧光强度在温度梯度中随时间而变化 (上左图中灰色部分)，然后将选定时间段内的荧光强度对应配体浓度进行拟合作图，软件自动计算得到该结合的亲和常数 K_d 值 (上右图)。

3. 仪器软件

智能软件自动进行数据分析，使您对实验结果更加自信。

对于大多数的软件，当您加载样品之后才会启动。但是 MO 软件别具一格——它不但可以在实验启动之前 为您提供每一步骤的详细指导，助您快速设置实验；而且实验结束时，会立即根据所得数据提供实验优化 建议，全程为您提供可靠信息。MO. Control 2 软件增加而了缓冲液条件优化功能，提高效率，帮助您快速获得结果。

4. 应用范围

Monolith 系列分子互作仪可以检测几乎所有类型的分子互作，包括蛋白，小分子，多肽，核酸， 脂类等，应用范围非常广泛。

（1）蛋白——小分子

  •  自噬—溶酶体靶向降解

  •  基于结构的药物设计

  •  “靶向降解组学”鉴定中药成分靶点

  •  中药小分子抑制剂作用机制

  •  靶向雄激素受体液 - 液相分离的药物开发

  •  新型泛素化反应的分子机制

（2）蛋白——离子

  •  植物硝态氮新受体

  •  植物免疫抑制与广谱抗病机理

  •  铜元素调节水稻广谱抗病毒的机制

  •  低温特异钙信号的感知和应答机制

（3）蛋白——多肽

  •  植物防止多精受精的分子机制

  •  小肽—受体激酶调控花粉与柱头识别的分子机理

  •  植物重要肽激素作用机理

  •  多肽 PROTAC 降解致癌蛋白

（4）蛋白——蛋白

  •  淬灭抑制蛋白 SOQ1 调节 qH 的作用机制

  •  胃癌基因治疗新靶点 CPEB3 作用机制研究

  •  精子与卵子受精识别的结构基础

  •  抗原表位研究

（5）蛋白——核酸

  •  CRISPR-Cpf1 识别剪切 RNA 的分子机制

  •  核酸适配体检测霉菌毒素

（6）蛋白——脂类

  •  新冠病毒 S 蛋白结合胆固醇

  •  调控蛋白与磷脂酰肌醇二磷酸识别机制

（7）蛋白——复合物

  •  蛋白酶体与去泛素化酶动态调控机制

（8）蛋白——纳米颗粒

  •  靶向乳酸代谢的工程仿生纳米颗粒治疗胶质瘤

  •  多肽修饰的纳米颗粒抑制病毒侵染

  •  核酸适配体修饰的纳米颗粒探针

（9）蛋白——糖类

  •  流感病毒结构改变介导病毒在人类传播的机制

（10）免纯化 / 无标记检测

  •  老药新用，Wnt/β-catenin 信号通路活性抑制

  •  血清中多克隆抗体 - 海洛因结合检测

  •  葡萄糖转运蛋白抑制剂